摘要:

目的:通过检测耐辐射奇球菌pprI基因活体转染系统性红斑狼疮(SLE)小鼠的氧化应激和疾病活动性指标,探讨其对SLE小鼠氧化应激状态的影响.方法:62只纯品系B6.MRL-FaslprNJU雌性小鼠随机分成3组,未转染组(20只),pEGFP-c1空载体转染组(20只),pEGFP-c1-pprI转染组(22只),纯品系C57BL/6健康小鼠作为健康对照组(20只).应用活体电转染技术将pEGFP-c1空载体及pEGFP-c1-pprI基因重组质粒转入SLE小鼠股前肌肉.Western blot鉴定转染后SLE小鼠外周血pEGFP-c1和pEGFP-c1-pprI融合基因表达.采用化学比色法检测各组小鼠外周血氧化应激标志物,ELISA法检测抗dsDNA抗体,免疫比浊法检测补体C4和C-反应蛋白.结果:①Western blot检测结果提示,质粒转染一周后均能在小鼠体内成功表达,且无毒副作用;②与未转染质粒和pEGFP-c1转染组SLE小鼠相比,pEGFP-c1-pprI转染组SLE小鼠GSH含量显著升高(P<0.01),丙二醛(MDA)、蛋白质羰基(Carbonyls)和氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量显著降低(P<0.01),超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性明显升高(P<0.05),血浆抗dsDNA抗体滴度和CRP含量显著降低(P<0.01),补体C4明显升高(P<0.05),与健康组相比,各项指标差异无统计学意义(P>0.05);③与未转染质粒和pEGFP-c1转染组SLE小鼠相比,pEGFP-c1-pprI转染组SLE小鼠淋巴细胞凋亡率和死亡率明显下降(P<0.01),与健康小鼠相比,差异无统计学意义(P>0.05).结论:耐辐射奇球菌pprI基因活体转染后能在SLE小鼠体内稳定表达且能调节体内的氧化应激状态,降低SLE小鼠的疾病活动度.