摘要:

目的 探讨基因重组人骨形成蛋白-2(rhMP-2)的诱骨活性及对骨髓基质细胞增殖分化的影响,了解其在体外作用的最佳浓度及其可能机制.方法 采用大鼠BMP异位成骨试验模型,进行rhBMP-2的诱骨活性评价;采用MTT法研究不同浓度的rhBMP-2对培养兔骨髓基质细胞增殖的影响;采用碱性磷酸酶(ALP)活性检测试剂盒和考马斯亮蓝染色分别研究不同浓度的rhBMP-2对骨髓基质细胞ALP活性及细胞总蛋白含量的影响.结果 rhBMP-2植入肌袋内,术后2周即可见大量骨母细胞形成,术后4周可见成熟新生骨组织.MTT结果显示在100ng/ml时,OD值达最高(0.170±0.033).ALP活性和细胞蛋白含量结果显示各实验组与对照组的OD值差异均有显著性(P＜0.05或＜0.01),且呈剂量-效应依赖关系.结论 rhBMP-2具有良好的诱骨活性,具有明显的促进骨髓基质细胞增殖和分化的作用,其作用呈剂量-效应依赖关系,有望应用于骨组织工程及临床骨缺损修复的研究中.

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目的:观察rhBMP-2聚氰基丙烯酸正丁酯纳米微球缓释系统对成骨细胞钙结节的影响.方法:培养诱导成骨细胞形成钙结节,并对其行特异性染色;在rhBMP-2纳米微球对钙结节作用后,采用扫描电镜观察其表面形态的改变,采用能谱仪分析比较其组成成分的改变.结果:rhBMP-2纳米微球能明显促进钙结节形成,且rhBMP-2纳米微球作用后钙结节中钙磷含量显著高于单纯rhBMP-2组.结论:rhBMP-2纳米微球缓释系统促进成骨的作用优于单纯rhBMP-2.

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目的研究局部应用基因重组人骨形成蛋白-2(rhBMP-2)对兔下颌牵张成骨的影响.方法在12只成年大耳白兔的双侧下颌骨前部行骨切开术,将rhBMP-2与胶原复合植入一侧下颌骨切开处,另一侧单纯植入胶原作对照.用自行研制牵张器延长双侧下颌骨6 mm,在牵张结束后第4周处死动物,取双侧牵张区新生骨痂行组织学、扫描电镜及Ca/P元素测定.结果下颌延长后两侧牵张间隙均有新骨形成,应用rhBMP-2的一侧牵张骨痂中的新骨组织比对照侧多而成熟,钙化程度较高.结论基因重组人骨形成蛋白-2可能有促进兔下颌牵张成骨的作用.

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目的:研究重组人骨形成蛋白-2(rhBMP-2)作为激活物促进骨缺损修复的进程.方法:72只大鼠采用左侧胫骨3 mm长的骨块缺损模型,随机分为3组,空白组、对照组(填入人工骨粉),实验组(填入100 μg/ml浓度的rhBMP-2与人工骨粉复合物).观察大鼠术区情况和生活状态,于术后4、8、12周分别处死大鼠,进行组织学检测和红外光谱分析.结果:空白组无法正常愈合;实验组的骨量形成和新骨改建速度明显高于对照组.结论:rhBMP-2对骨生成有促进作用,复合材料加速了骨缺损修复的进程.

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目的 探讨重组人骨形成蛋白-2(rhBMP-2)与胶原膜靶向结合后在兔颅骨引导骨再生(GBR)模型中的成骨效应.方法 将20只普通级雌性健康新西兰大白兔随机分成2周组和6周组,每组10只.所有大白兔均制备颅骨GBR模型,在颅顶骨植入4个钛筒,分别盖rhBMP-2/CBD胶原膜(rhBMP-2/CBD胶原膜组)、rhBMP-2胶原膜(rhBMP-2胶原膜组)、胶原膜(胶原膜组)和不盖膜(空白组).分别在2周和6周时处死各对应组的大白兔,取样制作硬组织切片和石蜡切片,染色后进行组织学观察.结果 2周时可见胶原膜阻挡了纤维组织的长入,4组钛筒上层均无新骨生成,其中rhBMP-2/CBD胶原膜组钛筒顶端毛细血管增生量明显较其余3组多.6周时可见rhBMP-2/CBD胶原膜组钛筒上层大量新骨生成,与来源于颅骨骨面的新骨界限明显,而其余3组钛筒顶端未见新骨生成.结论 rhBMP-2与胶原膜靶向结合可形成具有骨诱导性的胶原膜,缓释rhBMP-2使胶原膜下方大量新骨生成,表层成骨可阻止纤维组织的长入和防止植骨床的塌陷,使成骨速度加倍.

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目的 检测rhBMP-2/hTGF-β1/胶原复合材料与rhBMP-2/hTGF-β1生物学活性的差别.方法 本研究于2010年5-12月在福建医科大学附属口腔医院实验室进行.分离培养的Beagle犬骨髓基质细胞中加入质量浓度相同的rhBMP-2/hTGF-β1或rhBMP-2/hTGF-β1/胶原复合材料后继续培养4d,通过细胞计数(MTT法)、碱性磷酸酶(ALP)活性检测,分别对rhBMP-2/hTGF-β1/胶原复合材料和rhBMP-2/hTGF-β1的生物学活性进行检测,并比较其活性差别.结果 rhBMP-2/hTGF-β1/胶原复合材料和rhBMP-2/hTGF-β1均具有生物学活性,并且其生物学活性差异无统计学意义(P＞0.05).结论 这种合成rhBMP-2/hTGF-β1/胶原复合材料的方法不会改变生长因子的生物学活性.

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目的探讨重组人骨形成蛋白-2(rhBMP-2)对人牙龈成纤维细胞(GF)体外矿化能力的影响.方法以组织块培养法培养人牙龈成纤维细胞,分别以含或不含rhBMP-2的矿化培养液长期培养,以倒置显微镜观察细胞生长状况.于培养第7天检测碱性磷酸酶(ALP)活性.于培养第30天行von Kossa染色观察矿化结节.结果 rhBMP-2提高GF的ALP水平,呈剂量依赖性,并能够刺激GF在体外形成矿化结节.结论 rhBMP-2能够诱导人GF向成骨细胞表型分化.

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目的 探索上颌骨经缝牵引中(当弹性牵引力大于800 g)加入重组人骨形成蛋白-2(rhBMP-2)对新骨形成的影响.方法 将36只健康杂种犬随机分为5个组,即对照组、400 g组、600 g组、800 g组及800 g+ rhBMP-2组(联合组).术后1~8周处死动物,行X线检测及免疫组织化学染色检测.结果 各牵引组上颌骨成功前徙,以600 g组效果明显[(25.3±5.2)mm].800 g组在2周内牵引速度快,4周后明显减慢[(12.1±2.3)mm],但在注射rhBMP-2后得以改善[(24.2±3.4)mm].BMP-2、BMP-4、BMP-7阳性染色主要定位于成骨细胞细胞质中,BMP-7在注射rhBMP-2后光密度值明显增强.CT检测各牵引组腭骨水平板骨密度值明显减低,以800 g组最为显著[(317.8±185.5)HU],而在注射rhBMP-2后骨密度值明显增强[(1 158.0±93.0)HU].结论 骨缝牵引前移上颌骨能在微创早期延长骨长度;rhBMP-2可以有效促进骨形成并在调节rhBMP-7活性方面起到一定作用.

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目的：制备重组人骨形成蛋白-2-聚乳酸（rhBMP-2-PL）缓释纳米微球缓释系统，观察其对兔成骨细胞的生物学效应。方法：采用复乳-干燥法制备rhBMP-2纳米微球，观察其一般特性，并模拟体内条件研究BMP-PLA纳米微球的体外缓释特性。采用MTT法检测微球对成骨细胞增殖状况的影响，并与单纯rhBMP-2的作用进行比较。结果：纳米微球表面光滑圆整,球体大小均匀，平均粒径为44nm，rhBMP-2-PLA纳米微球的包封率和载药量分别为(92.14±1.13)%和[(133.81±0.6)×10-3]%。微球缓释系统有生物活性，能显著促进兔成骨细胞的增殖，其效应高于单纯施加rhBMP-2的效应。结论：rhBMP-2-PLA纳米微球缓释系统的作用明显优于单纯rhBMP-2，在骨创伤的治疗中有良好的前景。

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目的:制备rhBMP-2-PLA纳米微球缓释系统,观察其对兔成骨细胞的生物学效应.方法:采用复乳-干燥法制备rhBMP-2纳米微球,观察其一般特性,并模拟体内条件研究BMP-PLA纳米微球的体外缓释特性.采用MTY法检测微球对成骨细胞增殖状况的影响,并与单纯rhBMP-2的作用进行比较.结果:纳米微球表面光滑圆整,球体大小均匀,平均粒径为45 nm,rhBMP-2-PLA纳米微球的包封率和载药量分别为(90.67±1.23)%和[(134.65±0.44)×10-3]%,微球体外释药符合Higuichi方程.该微球缓释系统有生物活性,能显著促进兔成骨细胞的增殖,其效应高于单纯施加rhBMP-2的效应.结论:rhBMP-2-PLA纳米微球缓释系统的作用明显优于单纯rhBMP-2,在骨创伤的治疗中有良好的前景.