摘要:

目的：观察克唑替尼（crizotinib）诱导不同肺癌细胞株凋亡中HGF／c-Met信号通路的变化并探讨其调控机制。方法：采用噻唑蓝（MTT）法检测克唑替尼对H1993（c-Met扩增的肺腺癌细胞）、H2228（含有EML4-ALK融合基因的肺癌细胞）和A549细胞的活力抑制情况；采用流式细胞术检测3种细胞在克唑替尼作用后24 h、48 h和72 h的凋亡率；采用Western blot检测细胞在克唑替尼作用前后HGF／c-Met信号通路中MET蛋白及其磷酸化形式p-MET的水平，同时观察其下游通路关键蛋白AKT、ERK、p-AKT和p-ERK的变化情况。结果：MTT结果表明克唑替尼作用72 h后，H1993、H2228和A549细胞株的细胞活力抑制率均呈剂量依赖性升高。流式细胞术检测发现随着克唑替尼作用时间的延长，细胞凋亡率呈时间依赖性增加（ P＜0.05）。 Western blot 检测结果提示在H1993细胞株和H2228细胞株中，p-MET、p-AKT和p-ERK随着时间的延长蛋白水平呈现下降趋势。而在A549细胞株中p-AKT、p-ERK和p-MET在药物作用72 h后的变化趋势不明显。结论：初步证实HGF／c-Met信号通路与克唑替尼诱导肺癌细胞株H1993和H2228凋亡相关。