假单孢杆菌外毒素基因的克隆及用于裸鼠大肠癌基因治疗

• 作者: 张晓琴 戚中田 曹广文 杜平 潘欣 粟山茂树
• 来源期刊: 第二军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 假单孢杆菌外毒素 大肠肿瘤 基因疗法
• 年，卷（期）: 1998,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 106-109
• 分类号: R735.34
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0258-879X.1998.02.002

摘要

目的: 建立假单孢杆菌外毒素A(PEA)基因的组织特异性抗大肠癌基因疗法.方法: 用PCR法从绿脓杆菌基因组DNA中克隆PEAⅡ+Ⅲ区基因, 引入Kozak序列、终止信号和酶切位点, 测序.构建PEA基因转录受人癌胚抗原(CEA)启动子调控的逆转录病毒载体.共转染法体外研究PEA基因表达对报告基因表达的特异抑制作用.用DNA体内直接转染法于裸鼠体内观察PEA基因的抗人类肿瘤作用.结果: 所克隆的PEA序列与已报道序列基本相同.CEA启动子调控的PEA基因可在大肠癌细胞中特异性抑制荧光素酶基因表达, 在裸鼠体内对人大肠癌模型的直接转染能特异抑制人大肠肿瘤的生长.结论: PEAⅡ+Ⅲ区基因作为治疗基因, 适合于大肠癌特异性基因治疗.