RAPD技术在中国对虾DNA分析中的主要反应参数的探讨

• 作者: 刘志鸿 刘萍 孔杰 庄志猛 徐怀恕 石拓 邓景耀 韩玲玲
• 来源期刊: 中国学术期刊文摘
• 学科: 农学
• 关键词: RAPD技术 对虾 遗传多样性 反应参数
• 年，卷（期）: 1998,（9）
• 页码范围: 1114-1116
• 页数: 3页
• 分类号: S9
• 语种: 中文

摘要

为查清随机扩增多态DNA技术应用于遗传多样性研究中的最佳实验条件,取自然海捕的中国对虾为实验材料,将PCR仪程序固定为:94 ℃预变性2.0 min; 93 ℃变性1 min; 36 ℃退火1 min;72 ℃延伸2 min,45个循环后72℃再延伸5 min, 4 ℃自动保存的前提下,首先对RAPD技术的几个主要条件进行了摸索.一是Mg++浓度:终浓度为2.0 mmol/L的RAPD产物特异性好,电泳带清晰;二是Tag酶浓度:每个反应加入0.7～0.9 u,产物特异性好,产量也高;三是引物浓度:一般使用15 pmol/L的随机引物时,每个反应加入1～1.5 μL都会有产物生成,不会影响特异性,只是对产量会有影响;四是模板浓度:10～100 ng范围内,RAPD均有产物生成,但是,在10～20 ng范围内,产物特异性好且产量高.