基于pSPORTl质粒的转基因小鼠家系的建立

• 作者: 傅继梁 孙伟 李建秀 杨桦 王新民 王肖鹏 胡以平 郝光荣 黎怀星
• 来源期刊: 第二军医大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 转基因小鼠 诱变模型 lac I基因 质粒
• 年，卷（期）: 1998,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 9-12
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 字数: 2714字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0258-879X.1998.01.003

摘要

目的:建立在基因组中整合有pSPORTl质粒的转基因小鼠家系,为体内基因突变研究提供有效的动物模型.方法和结果:将2 594个经显微注射pSPORT1质粒DNA的小鼠受精卵分别移入103只受体母鼠的输卵管中,共产下237只仔鼠.采用PCR、PCR-Southern和基因组Southern杂交三级筛选法鉴定仔鼠.最后选择8只体质健壮、并经Southern杂交证实在基因组中pSPORTl质粒结构完整的小鼠用作Founder小鼠,进行转基因小鼠的建系工作.结果还显示,转基因的结构和移卵方式是分别影响转基因整合效率和母鼠受胎率的重要因素.其中,线状DNA的整合效率显著高于环状DNA,双侧输卵管移卵的母鼠受胎率高于单侧输卵管移卵.结论:(1)成功地建立了在基因组DNA中整合有pSPORT1质粒的转基因小鼠家系;(2)在制备转基因小鼠时采用线状DNA和双侧输卵管移卵将更为有效.