草鱼出血病病毒基因组的cDNA合成、克隆及部分序列分析

• 作者: 方勤 田静 邹桂平
• 来源期刊: 中国病毒学
• 学科: 生物学
• 关键词: 草鱼出血病病毒 cDNA克隆 序列分析
• 年，卷（期）: 1999,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 87
• 页数: 1页
• 分类号: Q93
• 字数: 2799字
• 语种: 英文

摘要

采用差速离心的方法纯化感染草鱼出血病病毒的细胞悬液.提纯的病毒粒子经蛋白酶K处理和酚-氯仿抽提,在1%琼脂糖凝胶电泳条件下分离得到11条dsRNA,利用柱离心式胶回收试剂盒纯化各基因片段.纯化的dsRNA溶于90%的DMSO中,70℃变性15min,然后采用随机引物法反转录合成各基因片段的cDNA,并平头连接于pZErO 2.0载体的EcoRV位点,电转化TOP10感受态细胞.重组质粒经酶切、PCR扩增得到大小不等的插入片段,cDNA-RNA斑点杂交的结果进一步证实其插入为目的基因片段.采用循环PCR测序的方法,对其插入片段进行了序列测定,对其中第11片段的部分序列作了报道.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邹桂平	中国科学院武汉病毒研究所	5	115	4.0	5.0
2	方勤	中国科学院武汉病毒研究所	16	315	10.0	16.0
3	田静	中国科学院武汉病毒研究所	80	686	17.0	21.0