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摘要:
目的寻找钩体病基因工程疫苗保护性抗原候选.方法 (1)鸟枪法构建赖型钩体017株基因库;(2)α互补、DNA 原位杂交筛选重组质粒;(3)Southern 杂交行 DNA 同源性分析;(4)双脱氧链中止测重组 DNA 序列及与外膜蛋白基因(omp)匹配;(5)IPTG 诱导重组子表达;(6)免疫印迹、MAT、EIA、MTT检测表达蛋白抗原特性及IL-2、IL-6活性;(7)纯化表达蛋白p68进行豚鼠主动免疫/攻击实验,观免疫保护性.结果 (1)重组质粒 pDJH2(亚克隆pDJt)插入片段1.9kb,与各致病钩体不同片段 DNA 高度同源;(2)序列测定插入片段实际1811bp,推测有2个读框(ORF),各有启动子、终止密码.查 Gen Bank/EMBL 无类似序列;(3)表达蛋白分子量68kD(p68);(4)p68是胸腺依赖性(TD)抗原,有良好抗原特性,抗血清效价1:524288,(EIA)具很强的动物免疫保护作用.结论 (1)p68编码基因是致病钩体保护性抗原基因;(2)p68是致病钩体外膜保护性抗原,可作钩体基因疫苗候选.
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内容分析
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文献信息
篇名 赖型钩体重组质粒及表达保护性抗原,p68的研究
来源期刊 中国人兽共患病杂志 学科 农学
关键词 钩体 重组DNA 表达蛋白p68 抗原性 免疫保护
年,卷(期) 1999,(5) 所属期刊栏目 论著
研究方向 页码范围 24-27
页数 分类号 R1|S8
字数 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1002-2694.1999.05.008
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 江南 四川省人民医院感染科 63 214 8.0 10.0
2 戴保民 华西医大钩体病研究室 1 1 1.0 1.0
3 李胜富 华西医大钩体病研究室 1 1 1.0 1.0
4 方之茂 华西医大钩体病研究室 1 1 1.0 1.0
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研究主题发展历程
节点文献
钩体
重组DNA
表达蛋白p68
抗原性
免疫保护
研究起点
研究来源
研究分支
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相关学者/机构
期刊影响力
中国人兽共患病学报
月刊
1002-2694
35-1284/R
大16开
福建省福州市津泰路76号
34-46
1985
chi
出版文献量(篇)
6893
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总被引数(次)
38474
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