蟾蜍血清梭曼水解酶的酶学性质及其单克隆抗体的制备

• 作者: 廖万国 徐勤惠 慕绍峰 李凤仙 肖美珍 荣康泰 邓瑞春
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 蟾蜍血清梭曼水解酶 酶学性质 单克隆抗体 ELISA
• 年，卷（期）: 1999,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 121-124
• 分类号: Q78
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.1999.02.010

摘要

蟾蜍血清梭曼水解酶(TSS)已被纯化.采用微量联苯胺法对该酶的酶学性质进行研究表明,该酶有两个最适pH,分别是pH7和pH10;最适作用温度为30℃;以梭曼为底物,在pH7.73,1/15 mol/L PB, 30℃条件下测定该酶的米氏常数为5.864 mmol/L,最大反应速度为692 μmol/L. Mg2+、Ca2+对TSS有激活作用,而Ni2+、Cu2+、Fe2+、Na+、K+对酶活性无明显影响.用TSS免疫Bal b/c小鼠,取其脾细胞在PEG4000作用下与P3x63-Ag8.653小鼠骨髓瘤细胞进行融合,获得8株能分泌抗TSS单克隆抗体的杂交瘤细胞株:AC11,AE8,DA3,DE5,DG3,EB4,EC4,EH4.用酶联免疫吸附试验对其分泌的抗体滴度进行检测,其腹水滴度最高可达2×107,对其中4株杂交瘤分泌的抗体相对亲合力进行测定,它们的大小顺序为DA3＞EH4＞DG3＞EC4;对其中6株杂交瘤分泌的抗体进行免疫球蛋白类型鉴定表明,6株单抗均为IgG1类.上述8株杂交瘤在体外连续培养6个月,分泌抗体水平未见下降.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐勤惠	军事医学科学院毒物药物研究所	12	49	5.0	6.0
2	荣康泰	军事医学科学院毒物药物研究所	14	59	6.0	7.0
3	邓瑞春		2	18	1.0	2.0
4	李凤仙	军事医学科学院毒物药物研究所	1	0	0.0	0.0
5	廖万国	军事医学科学院毒物药物研究所	1	0	0.0	0.0
6	慕绍峰	军事医学科学院毒物药物研究所	1	0	0.0	0.0
7	肖美珍	军事医学科学院毒物药物研究所	1	0	0.0	0.0