热休克蛋白90α(HSP90α)在大肠杆菌中的表达

• 作者: 乔绘红 周纯 徐枫 施一江 范云霞 袁兴华 赵玫 黄常志
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 热休克蛋白90α 基因表达 大肠杆菌
• 年，卷（期）: 2000,（3）
• 所属期刊栏目: 分子细胞免疫学
• 页码范围: 119-121
• 页数: 3页
• 分类号: Q784|R73-3
• 语种: 中文

摘要

目的:探讨热休克蛋白90α的生物学功能,获得高质量及充足的HSP90α蛋白.方法:采用PCR的方法扩增HSP90αcDNA5'端424 bp片段,在起始密码子位置制造一个NcoI酶切位点,将PCR产物克隆到中间载体,再通过合适的酶切位点将其余片段连接到此载体,形成一个带有NcoI突变位点的HSP90αcDNA全长克隆.最终将HSP90α全部编码cDNA插入到pET-16b表达载体中.结果:经诱导表达,SDS-PAGE凝胶电泳分离显示在分子量大约83 kD处有一诱导蛋白带.Western Blot证明表达产物与抗HSP90α抗血清有特异的免疫反应.结论:构建成了T7启动子控制下的HSP90α表达质粒.