脊尾白虾热休克蛋白HSP90基因的原核表达与鉴定

• 作者: 李健 李华 李吉涛 陈萍 韩俊英
• 来源期刊: 渔业科学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 脊尾白虾 热休克蛋白90 原核表达
• 年，卷（期）: 2011,（5）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 44-50
• 分类号: S945.1|Q959.223.1
• 字数: 4737字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-7075.2011.05.007

摘要

将脊尾白虾热休克蛋白90基因克隆到原核表达载体pET-30a中,经酶切验证和DNA测序鉴定后,将重组质粒转化表达宿主大肠杆菌Rosetta,优化温度、时间、IPTG和OD600表达条件进行诱导表达,收集茵液,进行SDS-PAGE和质谱检测,并用Quantity one软件分析蛋白表达水平.结果表明,成功构建了含脊尾白虾HSP90基因的重组表达载体pET-30a-HSP90,表达目的蛋白相对分子量为82.7kD,为HSP90蛋白.通过条件优化认为重组菌株Rosetta/pET-30a-HSP90的最佳诱导温度为37℃,最佳IPTG浓度为1.0 mmol/L,最佳诱导时机和诱导时间分别为0.58 h、7h.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李华		43	292	10.0	14.0
2	李健	农业部海洋渔业资源可持续利用重点开放实验室中国水产科学研究院黄海水产研究所	34	688	14.0	25.0
3	李吉涛	农业部海洋渔业资源可持续利用重点开放实验室中国水产科学研究院黄海水产研究所	5	42	4.0	5.0
4	陈萍	农业部海洋渔业资源可持续利用重点开放实验室中国水产科学研究院黄海水产研究所	3	44	3.0	3.0
5	韩俊英		1	13	1.0	1.0