用一种改进的粘粒文库筛选方法克隆人α-乳清白蛋白基因

• 作者: 冯继东 曹更生 李宁 赵要风
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 人α-乳清白蛋白基因 聚合酶链式反应 菌落原位杂交 粘粒文库
• 年，卷（期）: 2000,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 169-172
• 页数: 4页
• 分类号: Q94
• 字数: 3264字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2000.02.016

摘要

本文所介绍的粘粒文库筛选方法,是以PCR技术为基础[1],并针对粘粒克隆扩增的不均一性而设计的.从扩增一次的粘粒文库中(载体pWE15)取1～2×106个粘粒克隆,将其分成96份,经PCR筛选,从中找出阳性管;将阳性管中所有克隆按每板1～1.5×103个克隆的方式铺板培养(约200个平板),再筛选鉴定含有阳性克隆的菌落平板,最后将阳性菌落平板进行菌落原位杂交,成功地筛选到2个人的α-乳清白蛋白基因阳性克隆(45～55 kb); 特异引物直接对粘粒阳性克隆进行部分序列测定及鉴定分析,结果进一步证明该阳性克隆含有不完全的人α-乳清白蛋白基因,并绘出了该阳性克隆约10 kb的片段物理图谱.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李宁	中国农业大学农业生物技术国家重点实验室	317	6076	42.0	63.0
2	曹更生	河南大学生物工程系	14	116	5.0	10.0
3	赵要风	中国农业大学农业生物技术国家重点实验室	7	62	4.0	7.0
4	冯继东	中国农业大学农业生物技术国家重点实验室	17	484	10.0	17.0