Ribozyme对癌基因ki-rasG12V mRNA的剪切及其特异性

• 作者: 吴国祥 方裕强 李兆申 许国铭 陆德如
• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: ki-rasG12VmRNA 核酶 特异性定点切割
• 年，卷（期）: 2000,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 275-278
• 页数: 4页
• 分类号: Q522+.2
• 字数: 2598字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2000.04.010

摘要

目的：设计切割ki-rasG12vmRNA的特异性ribozyme(Rz217)，明确其对癌基因ki-rasG12VmRNA的细胞内外切割活性，为以ki-rasG12VmRNA为特异性靶分子的基因治疗及癌基因ki-ras的功能研究提拱一种新的途径。方法：依Symons总结的"锤头结构"原理，设计一种能特异性切割ki-rasG12VmRNA的ribozyme，利用DNA重组技术构建ki-rasG12V外显子1和ri-bozyme Rz217的体外转录质粒及ribozyme Rz217的真核表达质粒，体外转录获得ribozyme Rz217及ki-rasG12V外显子1 mRNA，在含Mg2+溶液中ribozyme Rz217对其靶RNA分子进行切割。以RT-PCR对转染ribozyme Rz217真核表达质粒的细胞ki-rasG12VmRNA进行半定量分析。结果：ki-rasG12V外显子1体外转录mRNA分子，能被ribozyme Rz217定点切割而野生型ki-ras外显子1体外转录mRNA则不被切割；转染ribozyme Rz217的胰癌细胞ki-rasG12VmRNA含量减少，而转染ribozyme Re217的肝癌细胞其内源性ki-ras mRNA含量无明显变化。结论：ribozyme Rz217无论在细胞内外均能剪切突变型ki-ras mRNA(G12V)而且其切割作用为突变型ki-rasG12VmRNA特异性的。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李兆申	第二军医大学长海医院消化内科	1030	7581	34.0	55.0
2	许国铭	第二军医大学长海医院消化内科	279	2118	23.0	34.0
3	吴国祥	第二军医大学长海医院消化内科	1	1	1.0	1.0
4	方裕强	第二军医大学长海医院消化内科	9	34	3.0	5.0
5	陆德如	第二军医大学长海医院消化内科	6	23	3.0	4.0