马铃薯遗传转化系统的优化及禽流感病毒(H5N1)基因的导入

• 作者: 夏宁邵 张军 曾定 杜海莲 肖平 陈启锋 陈红岩 韩冬丽 高毅
• 来源期刊: 厦门大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 遗传转化 禽流感病毒(H5N1)基因 马铃薯
• 年，卷（期）: 2000,（5）
• 所属期刊栏目: 海洋学·生命科学
• 页码范围: 699-706
• 页数: 8页
• 分类号: Q785
• 字数: 4540字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0438-0479.2000.05.021

摘要

通过对以马铃薯(Solanum tuberosum L.)块茎为受体的农杆菌转化系统进行优化,筛选出使三个品种(鲁引1号、克新3号、优金)的受体均可得到高频分化的培养基:MS+2.0 mg/L BA+3.0 mg/L ZT+0.5 mg/L NAA+0.5 mg/L GA.对几种农杆菌转化条件的比较研究发现,菌体用Ms+0.5 mg/L GA 液体重悬并稀释4倍,与受体于28 ℃,100 r/min振荡侵染20～30 min,共培养时在分化培养基上加30 μ mol/L AS(乙酰丁香酮),16 h弱光照共培养3 d,可使马铃薯品种鲁引1号的转化效率较常规方法提高5～7倍.将禽流感病毒(H5N1)基因与35S启动子及nos终止子构建表达载体p1301H5N1,直接法转入农杆菌EHA105,用此菌株转化马铃薯得到再生植株.基因组总DNA经PCR和Southern杂交证明目的基因已整合到马铃薯基因组中.