抗兔晶状体上皮细胞单克隆抗体的制备及特异性研究

• 作者: 刘芙蓉 宋今丹 张劲松 才娜
• 来源期刊: 眼科新进展
• 学科: 医学
• 关键词: 兔晶状体上皮细胞 杂交瘤细胞 单克隆抗体 免疫荧光 免疫组化SP
• 年，卷（期）: 2000,（6）
• 所属期刊栏目: 研究原著
• 页码范围: 385-387
• 页数: 3页
• 分类号: R776
• 字数: 3401字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1003-5141.2000.06.001

摘要

目的为防治白内障术后因晶状体上皮细胞增殖而产生的后发性白内障，制备抗家兔晶状体上皮细胞的单克隆抗体，从而更进一步以其为载体与细胞毒素偶联，特异性抑制晶状体上皮细胞生长而不损伤眼内其他组织，为防治后发性白内障奠定实验基础。方法应用家兔晶状体上皮细胞与佐剂混合，免疫BALB/c小鼠，通过聚乙二醇（PEG-4000）使被免疫的小鼠脾细胞与同系小鼠骨髓瘤细胞融合，细胞融合之后，经过HAT选择性培养液培养，用间接免疫荧光抗体法和免疫组化SP法检测杂交瘤细胞上清夜中的抗体，筛选出呈阳性反应的杂交瘤细胞，再经3次甲基纤维素克隆化培养以保证单克隆抗体的特性，最后将此单克隆抗体对人眼组织进行交叉反应。结果被免疫的小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0通过PEG-4000融合后，经HAT选择性培养，16d后杂交瘤细胞克隆产生，对其进行3次甲基纤维素培养基克隆化培养，获得检测抗体阳性率达100%的克隆系为一株。用免疫组化SP 法检测此抗体仅对兔晶状体上皮细胞抗原呈阳性反应，而对兔眼角膜、虹膜、人眼角膜、虹膜、晶状体上皮细胞呈阴性反应。结论成功制备了抗家兔晶状体上皮细胞的单克隆抗体，此单克隆抗体具有较强的特异性，对人眼组织无交叉反应，为进一步导向治疗后发性白内障奠定实验基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘芙蓉	中国医科大学分子生物学实验室	16	108	7.0	10.0
2	宋今丹	中国医科大学分子生物学实验室	72	443	12.0	17.0
3	张劲松	中国医科大学第一医院眼科	158	654	13.0	17.0
4	才娜	中国医科大学第一医院眼科	38	243	8.0	13.0