小鼠白细胞介素-12融合蛋白编码基因的构建与表达研究

• 作者: 刘妍 成军 斯崇文 杨继珍 王勤环 董菁 赵鸿 钟彦伟
• 来源期刊: 免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 白细胞介素-12 融合蛋白 转染 多聚酶链反应 甘氨酸接头
• 年，卷（期）: 2000,（1）
• 所属期刊栏目: 基础免疫学
• 页码范围: 33-36
• 页数: 4页
• 分类号: R392.11
• 字数: 3627字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-8861.2000.01.010

摘要

目的构建小鼠白细胞介素-12的融合基因,并进行初号表达.方法通过重叠序列引物的设计与多聚酶链反应(PCR)技术,将小鼠IL-12的40kDa多肽链基因与35kDa多肽链基因,以甘氨酸接头(Gly4Ser)3序列连接成为融合蛋白编码基因,构建融合蛋白表达载体,转染小鼠成纤维细胞SVT2,表达具有生物学活性的融合蛋白型IL-12.结果构建的小鼠IL-12表达载体经测序无突变发生.以G418筛选转染的SVT2细胞,获得数十个抗性细胞克隆,测定其IL-12生物学活性,分泌量达52.1～112.6pg/ml.表达的融合型小鼠IL-12具有生物学活性.结论构建并表达了单链型小鼠白细胞介素-12.