具有GPX活力的抗体片段Fv的制备和性质

• 作者: 刘俊秋 时成波 罗贵民 阎岗林
• 来源期刊: 高等学校化学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 谷胱甘肽过氧化物酶 化学突变 抗体Fv片段 抗体酶 人工酶
• 年，卷（期）: 2000,（4）
• 页码范围: 566-569
• 页数: 4页
• 分类号: Q554
• 字数: 2684字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0251-0790.2000.04.010

摘要

具有谷胱甘肽(GSH)结合部位的鼠抗体3H4(IgM)经胃蛋白酶水解, 产生分子量为25 000的抗体Fv片段, 用荧光滴定法测定了它与GSH的亲和常数Ka=1.17×107 L/mol. 该片段经苯甲基磺酰氟活化, 再经NaHSe作用, 其结合部位的丝氨酸被突变为谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)的催化基团硒代半胱氨酸. 突变后的Fv片段表现出很高的GPX活性, 其活力高达2 500 U/μmol, 称为Fv抗体酶. 动力学分析表明, Fv酶的最适温度为55 ℃, 最适 pH为7.0, 催化机制为乒乓机制, 米氏常数分别为: Km(GSH)=4.16×10-3 mol/L, Km(H2O2)=2.8×10-4 mol/L.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘俊秋	吉林大学分子酶学工程教育部重点实验室	10	98	4.0	9.0
2	罗贵民	吉林大学分子酶学工程教育部重点实验室	38	287	9.0	15.0
3	阎岗林	吉林大学分子酶学工程教育部重点实验室	6	62	3.0	6.0
4	时成波	吉林大学分子酶学工程教育部重点实验室	2	37	2.0	2.0