U1RNP70KD,Sm-D,SSB及β2GP1自身抗原的重组表达及临床研究

• 作者: 叶萍 吕良敬 杨程德 沈南 薛峰 赵阴环 郑捷 陆瑜 陈顺乐
• 来源期刊: 上海医学
• 关键词: 自身抗原 基因克隆 风湿性疾病
• 年，卷（期）: 2000,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 263-266
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0253-9934.2000.05.003

摘要

目的制备U1RNP70KD,Sm-D,SSB及β2GP1重组自身抗原,探讨自身免疫性疾病的机理及提高临床自身抗体检测的敏感性和特异性.方法应用逆转录PCR方法克隆β2GP1及其第5功能区(D5),U1RNP70KD及其U1RNA结合功能区(BD),Sm-D和SSB的编码基因,经原核表达系统(PGEX-2T)进行表达、鉴定及纯化,并分析β2GP1及U1RNP70KD抗原表位的定位,进而以重组抗原为基质建立新型免疫印迹及酶联免疫吸附检测法.结果成功表达纯化了上述重组抗原;定位研究显示β2GP1-D5及U1RNA-BD分别为β2GP1及U1RNP70KD的主要抗原表位区域;新型重组检测法的测定结果与常规检测系统比较基本相吻合.结论重组蛋白具有良好的特异性,可进一步作为抗原表位研究的手段,并可用于临床自身抗体检测.