癌-睾丸抗原GAGE-1基因的重组、表达及纯化

• 作者: 卓少元 封毅 李立志 范蓉 赵飞兰 钟卫干
• 来源期刊: 肿瘤防治研究
• 学科: 医学
• 关键词: GAGE-1 原核表达 纯化 融合蛋白
• 年，卷（期）: 2014,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 248-251
• 分类号: R730
• 语种: 中文
• DOI: 10.3971/j.issn.1000-8578.2014.03.011

摘要

目的 为进一步研究临床应用癌-睾丸抗原GAGE-1诱导特异性抗肿瘤免疫反应,对GAGE-1基因进行克隆、体外原核重组表达及蛋白分离纯化.方法 运用RT-PCR技术从人QGY-7701肝癌细胞株中扩增GAGE-1基因片段,插入原核表达载体pGEX-6p-1中,构建重组表达质粒pGEX-6p-1-GAGE-1,并导入大肠杆菌BL21,IPTG诱导目的蛋白表达;经包涵体透析复性及GST柱亲和层析纯化目的蛋白,SDS-PAGE电泳分析鉴定.结果 扩增得到GAGE-1基因5'端251 bp片段,与GeneBank公布的序列一致,构建的PGEX-6p-1-GAGE-1原核表达质粒经IPTG诱导,在大肠杆菌中表达分子量约35.7 kD的GST-GAGE-1融合蛋白,纯化后蛋白纯度为90％以上.结论 成功构建PGEX-6p-1-GAGE-1重组表达质粒,并成功表达纯化了GST-GAGE-1融合蛋白,为进一步深入研究GAGE蛋白奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李立志	广西民族医院普外科	22	104	7.0	9.0
2	范蓉	广西中医药大学组胚教研室	51	112	5.0	9.0
3	赵飞兰	广西中医药大学组胚教研室	33	59	4.0	6.0
4	钟卫干	广西中医药大学生化教研室	22	124	6.0	10.0
5	卓少元	广西中医药大学生化教研室	33	119	6.0	10.0
6	封毅	广西中医药大学生化教研室	19	114	6.0	10.0