卤虫体外转录模型及其转录活性检测

• 作者: 李钦 杨丰 林雄晖
• 来源期刊: 高技术通讯
• 学科: 农学
• 关键词: 卤虫 体外转录 RT-PCR 基因转录调控
• 年，卷（期）: 2001,（6）
• 所属期刊栏目: 研究通讯
• 页码范围: 5-8
• 页数: 4页
• 分类号: S94|Q5
• 字数: 3625字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1002-0470.2001.06.002

摘要

通过改进的细胞核提取方法,获取了纯度较高的细胞核并建立了卤虫体外转录系统模型.将待检测基因与含转录起始位点的报告基因的编码序列相连,制备成体外转录模板.由于体外转录所产生的RNA量极少,需要一种灵敏的方法检测生成的RNA.应用了RT-PCR技术鉴定体外转录产物的方法能有效解决这一问题.转录后,用无RNase的DNaseI将DNA模板完全降解;生成的RNA经逆转录反应合成cDNA,再以cDNA为模板,用相应的引物进行PCR扩增,琼脂糖凝胶电泳检测结果.该法灵敏度高,操作简单安全,无需同位素.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨丰		34	336	12.0	17.0
2	李钦		1	7	1.0	1.0
3	林雄晖		1	7	1.0	1.0