活疫苗及其生产基质中Sendai病毒RT-PCR检测方法的研究

• 作者: 卫礼 吴惠英 姚智慧 巩薇 祝晓春 董关木 贺争鸣 邢瑞昌
• 来源期刊: 中国实验动物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 副流感病毒Ⅰ型 聚合酶链反应 疫苗,减毒 细胞培养
• 年，卷（期）: 2001,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 143-145
• 页数: 3页
• 分类号: Q93-332
• 字数: 1867字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-4847.2001.03.004

摘要

目的建立检测Sendai病毒的RT-PCR方法并应用于活疫苗及其生产基质中Sendai病毒的检测.方法将Sendai病毒E17株接种9日龄鸡胚尿囊腔,72 h后收集尿囊液,用于提取病毒RNA,并逆转录成cDNA,用两对针对Sendai病毒NP基因设计的外引物和内引物分别进行扩增.扩增产物克隆于T-载体,并测序.尿囊液按10倍倍比稀释,进行敏感性实验.将该方法用于检测乙脑减毒活疫苗和用于生产疫苗用的普通级乳地鼠肾中的Sendai病毒.结果外引物和内引物的PCR分别扩增出684 bp和248 bp的片段,外引物PCR产物的测序结果与Genbank报告的序列完全一致.敏感性实验结果表明,第一次PCR可检测到10-4病毒滴度,巢式PCR可检测到10-7病毒滴度.乙脑减毒活疫苗和乳地鼠肾的检测结果为阴性.结论建立检测Sendai病毒的RT-PCR方法具有很高的特异性和敏感性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	巩薇		10	75	5.0	8.0
2	卫礼		10	96	5.0	9.0
3	贺争鸣		122	809	15.0	21.0
4	邢瑞昌		56	497	13.0	19.0
5	董关木		87	672	14.0	22.0
6	吴惠英		6	30	3.0	5.0
7	姚智慧		23	139	6.0	11.0
8	祝晓春		3	5	2.0	2.0