重组人血管抑素的纯化和生物活性鉴定

• 作者: 卢文菊 张晓实 罗进贤 陈柏铭
• 来源期刊: 广州医学院学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 血管抑素 重组蛋白质类 纯化 生物活性鉴定
• 年，卷（期）: 2001,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 5-8
• 页数: 4页
• 分类号: Q789
• 字数: 3551字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-1836.2001.02.002

摘要

目的:纯化大肠杆菌表达的重组人血管抑素(rhAGN)并鉴定其抗血管生成生物活性.方法:通过超声破碎、包涵体洗涤、Sephadex G-100凝胶过滤层析等步骤初步纯化rhAGN,Lowry法测定蛋白浓度,SDS-PAGE分析观察其纯度;应用MTT法观察在终浓度为0.1～3.0 mg/L范围内rhAGN对10μg/L EGF刺激的人真皮微血管内皮细胞系HDMEC的增殖抑制活性;以PBS为对照(n＝5),应用原位鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)技术观察100μg/只(n＝5)和200μg/只(n＝5)rhAGN作用72 h对30ng bFGF诱导的鸡胚CAM毛细血管生成的抑制作用.结果:①rhAGN电泳纯度达到96%,总回收率为61.7%;②rhAGN对HDMEC细胞增殖的最大抑制剂量约为2.0 mg/L,抑制率约92.3%,半数最大抑制剂量在1.0 mg/L附近;③100 μg/只和200 μg/只rhAGN组鸡胚CAM载样滤纸片下毛细血管数目分别为79士23条和37士11条,两组间比较差异显著(P＜0.05);与对照组(145士36条)相比,均有显著性差异(P＜0.01).结论:rhAGN达到了较高的电泳纯度,纯化产物呈剂量依赖性抑制内皮细胞增殖,并能显著抑制鸡胚CAM血管生成,具有抗血管生成活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	罗进贤	中山大学生命科学学院	43	262	9.0	14.0
2	陈柏铭	广州医学院检验系	39	216	7.0	13.0
3	卢文菊	广州医学院检验系	12	53	4.0	6.0
4	张晓实	中山医科大学肿瘤防治中心	7	32	3.0	5.0