重组人胱抑素C的原核表达及鉴定

• 作者: 张宏斌 武婕 王捷 赵华福
• 来源期刊: 医学分子生物学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 胱抑素C 原核表达 纯化
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 204-207
• 分类号: R785
• 字数: 2649字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-8009.2012.03.010

摘要

目的 构建重组人胱抑素C(cystatin C,Cys C)的原核高效表达质粒,诱导表达并纯化获得Cys C重组蛋白.方法 根据大肠埃希菌编码蛋白的特性设计Cys C编码基因序列,人工合成目的 基因克隆至pET-22b(+)表达载体中,测序及酶切鉴定正确后诱导其在大肠埃希菌BL21中表达,所获得的包涵体蛋白经亲和层析纯化后采用SDS-PAGE及Western印迹鉴定.结果 酶切结果证实构建的表达质粒结构正确;测序结果显示克隆的基因序列所编码的蛋白与GenBank中的CysC氨基酸序列相符;SDS-PAGE及Western印迹结果证实获得的重组CysC融合蛋白分子量约为16 kD,经Ni2+亲和层析纯化获得纯度大于90 %的目的 蛋白.结论 建立了重组人Cys C的原核高效表达系统并获得了Cys C重组蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王捷	广州军区广州总医院医学实验科	255	1186	14.0	20.0
2	张宏斌	广州军区广州总医院医学实验科	95	457	11.0	16.0
3	赵华福	广州军区广州总医院医学实验科	11	28	3.0	4.0
4	武婕	广东省疾病预防控制中心病原微生物检验所	12	27	2.0	5.0