特异性单引物PCR

• 作者: 余升红
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 特异性单引物PCR 方法 重组子筛选
• 年，卷（期）: 2001,（6）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 44-45
• 页数: 2页
• 分类号: Q811.9
• 字数: 1004字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-311X.2001.06.019

摘要

建立特异性单引物PCR,并用于筛选基因克隆重组子.根据α-globin的一段序列设计引物,按照设计好的特性单引物PCR扩增条有α-globin的重组质粒PLNSX-αglobin,具体扩增条件如下:(1)97℃5min变性后,94℃30s,70℃2min,72℃2min30s,30个循环,制备单链模板 ;(2)94℃1min,12℃5min,16℃3min,18℃3min,20℃3min,22℃3min,25℃1min,30℃3min,37℃3min,72℃6min,低温条件下引物3′端4～5个碱基与所扩单链模板退火配对,扩增得到一系列不同起始位点但同一序列末端长短一的核酸片段;(3)以上述所得片段为模版进行如下条件的扩增:94℃30min,70℃2min,72℃2min,(每个循环增加1s),45个循环.结果,特异性单引物PCR能够从pLNSX-αglobin上扩增出特异带,可有效用于筛选基因克隆重组子.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	余升红	广州中山医科大学遗传教研室	13	29	3.0	5.0