丙型肝炎病毒5＇NCR转基因细胞模型及在反义核酸药物筛选和评价中的应用

• 作者: 毛秉智 王升启 王小红 管伟
• 来源期刊: 自然科学进展
• 学科: 医学
• 关键词: 丙型肝炎病毒 反义寡核苷酸 荧光素酶 HepG2.9706细胞
• 年，卷（期）: 2001,（4）
• 所属期刊栏目: 博士后研究
• 页码范围: 434-439
• 页数: 6页
• 分类号: R511
• 字数: 3865字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1002-008X.2001.04.018

摘要

为了进行以基因为靶的抗丙型肝炎病毒(HCV)药物的筛选及评价,将HCV5＇NCR-C基因与荧光素酶基因的融合基因片段插入pCI-neo表达载体,通过PCR扩增、酶切反应及荧光素酶瞬间表达活性鉴定,获得HCV 5＇NCR调控荧光素酶的稳定表达质粒pHCV-ne04,将其转染HepG2细胞,经GA18筛选,从150个克隆中获得一个高荧光素酶活性表达的细胞株HepG2.9706.该株细胞内HCV片段的DNA及mRNA检测均呈阳性,转基因拷贝数为140.利用该细胞株,通过脂质体介导,对3条针对HCV调控基因的反义寡核苷酸(ASODNs)即HCV363,HCV349,HCV279进行了活性评价,结果显示,三种ASODNs均具有特异性的剂量依赖性抑制活性,浓度在0.5μmol/L时,三者对HCV 5＇NCR调控荧光素酶表达抑制率分别为61%,55%及48%.该研究提示反义寡核苷酸有可能成为治疗HCV的新途径.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	毛秉智	军事医学科学院放射医学研究所	57	413	10.0	18.0
2	王升启	军事医学科学院放射医学研究所	315	3297	28.0	41.0
3	王小红	军事医学科学院放射医学研究所	11	259	5.0	11.0
4	管伟	军事医学科学院放射医学研究所	20	116	6.0	9.0