具有高谷胱甘肽合成活性重组大肠杆菌的构建及合成反应过程

• 作者: 李华钟 李寅 林金萍 陈坚
• 来源期刊: 微生物学报
• 学科: 工学
• 关键词: 谷胱甘肽 重组大肠杆菌 构建 生物合成 反应机理
• 年，卷（期）: 2001,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 16-24
• 页数: 9页
• 分类号: TQ464.7
• 字数: 5278字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0001-6209.2001.01.004

摘要

以野生型大肠杆菌E.coli Ⅱ为宿主细胞,转化带有编码谷胱甘肽合成酶系的基因gsh Ⅰ和gshⅡ的质粒pGH501,获得了一株谷胱甘肽合成活性、质粒稳定性和传代稳定性俱佳,并且能够重复使用的重组大肠杆菌E.coliⅡ-1.该菌株经过甲苯处理后,能够在胞外积累4g/L左右的谷胱甘肽(GSH).在合成反应体系中,提高L-谷氨酸浓度可促进GSH合成,但L-半胱氨酸浓度增大到20mmol/L后会抑制GSH的合成.根据GSH合成反应中能量辅因子的变化情况,提出E.coliⅡ-1细胞控制的GSH合成反应机理:由谷胱甘肽合成酶(GSH-Ⅱ)控制的第二步反应的能量供体是ADP而非ATP,该反应是整个GSH合成反应的限速步骤,高浓度ADP可能会抑制GSH-Ⅱ的活性.在GSH合成反应体系中添加100mmol/L的L-丝氨酸-硼酸钾混合物,可以有效地防止GSH的进一步降解,反应3 h后,GSH产量达到23.0mmol/L(约7.1g/L).

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李寅	无锡轻工大学生物工程学院	11	346	10.0	11.0
2	陈坚	无锡轻工大学生物工程学院	53	1308	23.0	35.0
3	李华钟	无锡轻工大学生物工程学院	10	246	7.0	10.0
4	林金萍	华东理工大学生物工程学院	11	126	4.0	11.0