二硫键稳定的抗肝癌人源化单链抗体-突变体人TNFα融合基因在CHO(dhfr-)细胞中的表达

• 作者: 俞炜源 吕国华 吴涛 孙志伟 林建波 韩素文
• 来源期刊: 军事医学科学院院刊
• 学科: 医学
• 关键词: 肝细胞瘤 单链抗体 肿瘤坏死因子α 突变 靶向细胞因子 CHO细胞
• 年，卷（期）: 2001,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 241-245
• 页数: 5页
• 分类号: R735.7
• 字数: 4402字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-9960.2001.04.001

摘要

目的:提高抗肝癌靶向人肿瘤坏死因子(hScFv25-hTNFα)的稳定性和杀伤活性,构建二硫键稳定的抗肝癌人源化单链抗体-突变体人TNFα融合基因(ds-ScFv-hTNFα),并在CHO细胞中表达.方法:常规构建ds-ScFv-hTNFα融合基因,并克隆入真核表达载体pCI(dhfr1),磷酸钙共沉淀法转染中国仓鼠卵巢细胞株(CHO-dhfr-),甲氨蝶呤(MTX)高压筛选高表达细胞株,免疫荧光染色和MTT法检测重组蛋白的抗体和突变体hTNFα的双重活性.结果:目的基因在CHO(dhfr-)中获得了表达,表达产物具有抗体和突变体hTNFα的双重活性,且稳定性得到大幅度提高,达到4℃放置4个月活性无明显下降. 结论:抗肝癌人源化ds-ScFv- hTNFα融合基因在CHO细胞中获得功能性表达,为进一步的临床应用研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	俞炜源	军事医学科学院生物工程研究所	87	518	11.0	17.0
2	孙志伟	军事医学科学院生物工程研究所	68	390	10.0	16.0
3	林建波	军事医学科学院生物工程研究所	18	66	6.0	7.0
4	韩素文	军事医学科学院生物工程研究所	3	6	2.0	2.0
5	吴涛	军事医学科学院生物工程研究所	3	2	1.0	1.0