人源抗TNF-α抗体Fab基因的单链化及其表达和纯化

• 作者: 何君 刘一平 张广育 王慧 白洁 袁斌 黄策
• 来源期刊: 生命科学研究
• 学科: 医学
• 关键词: 单链抗体 人源抗体 肿瘤坏死因子 基因表达
• 年，卷（期）: 2001,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 56-59
• 页数: 4页
• 分类号: Q786|R73
• 字数: 2963字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-7847.2001.01.011

摘要

构建人源抗TNF-α单链抗体基因，并尝试其在E.coli中的表达和纯化。采用人工接头，按VH-linker-VL的结构将人源抗TNF-α的VH、VL基因拼接成单链抗体（ScFv）基因；并将构建好的ScFv基因插入表达载体pQE30；转染E.coli M15，以IPTG诱导表达，并用Ni-NTA树脂纯化表达产物。构建的ScFv 基因长723 bp, 序列分析表明，该序列拼接正确；SDS-PAGE显示，用重组的pQE30转化的M15菌经诱导后，有相对分子质量（Mr）约为52 000的外源蛋白表达，Ni-NTA树脂纯化的表达产物纯度大于90%。因此，成功地构建了人源抗TNFα的ScFv基因，并在E.coli DH5α中表达和纯化了该基因的产物。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王慧	军事医学科学院微生物流行病研究所	48	107	5.0	8.0
2	袁斌	军事医学科学院微生物流行病研究所	20	40	3.0	4.0
3	何君	军事医学科学院微生物流行病研究所	41	213	8.0	12.0
4	白洁		7	57	2.0	7.0
5	黄策	军事医学科学院微生物流行病研究所	10	13	3.0	3.0
6	刘一平	军事医学科学院微生物流行病研究所	7	22	2.0	4.0
7	张广育	首都医科大学微生物教研室	2	0	0.0	0.0