抗TNF-α蛋白Fab抗体的制备和鉴定

• 作者: 张婷 李宏杰 李常颖 畅继武
• 来源期刊: 山东医药
• 学科: 医学
• 关键词: 噬菌体抗体库 抗原结合片段 肿瘤坏死因子-α
• 年，卷（期）: 2008,（30）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 14-16
• 页数: 3页
• 分类号: R730.51
• 字数: 2314字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-266X.2008.30.006

摘要

目的 制备人源性抗肿瘤坏死因子(TNF)-α蛋白的可溶性Fab抗体.方法 用固相化的TNF-α蛋白从人天然Fab噬菌体抗体库中筛选出表达抗TNF-α蛋白Fab抗体的阳性克隆,经酶切及连接反应构建可溶性表达噬菌粒并转化至大肠杆菌BL21(DE3)pLysS中,IPTG高效可溶性表达,SDS-PAGE及Western blot分析鉴定抗体表达情况,ELISA鉴定其抗原结合活性和特异性.结果 筛选并表达了人源性抗TNF-α蛋白的Fab抗体,在非还原SDS-PAGE中形成相对分子质量47 kD的条带;Westem blot分析证实表达的蛋白即Fab抗体;ELISA筛选出的2株抗体(TA-04、TA-13)具有良好的抗原特异性和抗原结合活性,与小牛血清白蛋白无交叉反应.结论 成功制备并鉴定了人源性抗TNF-α蛋白的可溶性Fab抗体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	畅继武		59	139	6.0	8.0
2	李宏杰		32	153	8.0	11.0
3	李常颖		19	27	3.0	4.0
4	张婷		8	3	1.0	1.0