基因工程技术制备抗IL-2蛋白抗体Fab片段及其鉴定方法的建立

• 作者: 李宏杰 李常颖 畅继武
• 来源期刊: 解放军医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 噬菌体抗体库 免疫球蛋白类,Fab 白细胞介素2
• 年，卷（期）: 2008,（5）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 534-536
• 页数: 3页
• 分类号: R730.51
• 字数: 2848字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0577-7402.2008.05.017

摘要

目的 利用基因工程技术制备人源性抗IL-2蛋白的可溶性Fab抗体片段,并鉴定其抗原结合活性及特异性.方法 用固相化的IL-2蛋白从人天然噬菌体抗体库中筛选出表达抗IL-2蛋白Fab抗体片段的阳性克隆,酶切及连接反应构建可溶性表达噬菌粒转化至大肠杆菌B121(DE3)pLysS中,IPTG诱导表达,并用SDS-PAGE鉴定抗体表达情况、ELISA鉴定其抗原结合活性和特异性.结果 成功筛选并表达了抗IL-2蛋白的Fab段抗体,在SDS-PAGE中形成47kD的条带,Western blot证明为抗人Fab段抗体;LISA证实该抗体片段具有良好的抗原特异性和抗原结合活性,与牛血清白蛋白、IL-4无交叉反应.结论 成功表达并鉴定了人源性抗IL-2蛋白的可溶性Fab片段,构建了一种制备基因工程抗体的有效途径,为基因工程抗体在肿瘤免疫治疗方面的临床应用研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	畅继武	天津医科大学第二医院天津市泌尿研究所	59	139	6.0	8.0
2	李宏杰	华北煤炭医学院基础部病理生理学教研室	32	153	8.0	11.0
3	李常颖	天津医科大学第二医院天津市泌尿研究所	19	27	3.0	4.0