嵌合性抗ROR1抗体Fab片段的制备及鉴定

• 作者: 张宁芝 梅思伟 殷郑娜 蒋秀敏
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: ROR1 Fab片段 嵌合性抗ROR1抗体 卵巢癌
• 年，卷（期）: 2020,（13）
• 所属期刊栏目: 免疫学技术与方法
• 页码范围: 1610-1614
• 页数: 5页
• 分类号: R318
• 字数: 4124字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2020.13.014

摘要

目的:构建嵌合性抗ROR1抗体Fab片段原核表达载体,初步探讨该抗体的生物学特性.方法:利用小鼠免疫和细胞融合,选取阳性克隆细胞株,在此基础上,运用基因工程技术扩增得到抗体轻链和重链,经酶切后与原核表达质粒pETDUET-1连接,构建重组表达质粒,将该重组质粒转入E.coli BL21中表达、纯化,SDS-PAGE、Western blot及ELISA对该抗体进行鉴定和分析,流式细胞术及免疫荧光初步检测该抗体与卵巢肿瘤细胞的特异性结合能力.结果:筛选出分泌抗ROR1抗体的杂交瘤单克隆细胞株,在此基础上,成功扩增抗体轻链和重链并构建嵌合性抗ROR1抗体Fab段原核表达载体,经检测证实抗ROR1抗体Fab段可与ROR1抗原和卵巢肿瘤细胞特异性结合.结论:初步验证嵌合性抗ROR1抗体Fab片段可与卵巢肿瘤细胞结合,为进一步探究抗体肿瘤靶向治疗奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张宁芝		9	48	4.0	6.0
2	殷郑娜		1	0	0.0	0.0
3	梅思伟		1	0	0.0	0.0
4	蒋秀敏		1	0	0.0	0.0