人源性抗核抗体Fab片段噬菌体抗体库的构建

• 作者: 李爱民 罗荣城 钱新宇 陆慧琦 韩焕兴
• 来源期刊: 解放军医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 抗体,抗核 抗体,单克隆 噬菌体抗体库 肿瘤
• 年，卷（期）: 2007,（11）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 1141-1144
• 页数: 4页
• 分类号: R392-33
• 字数: 3845字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0577-7402.2007.11.014

摘要

目的 构建人源性抗核抗体(ANA)Fab片段噬菌体抗体库.方法 从4名ANA滴度大于1∶10 000的自身免疫病患者外周血淋巴细胞中抽提总RNA,用RT-PCR技术扩增免疫球蛋白分子轻链κ、λ基因及重链Fd基因.将轻链基因片段克隆入pComb3Hss载体以构建轻链文库,随后将重链基因载入κ/λ-pComb3Hss载体,形成κ/λ-Fd-pComb3Hss质粒,然后将重组质粒转化大肠杆菌XL1-Blue.用辅助噬菌体M13 KO7感染XL1-Blue,随机的重组抗体文库即表达于丝状噬菌体表面.结果 扩增了长度为660bp的轻链κ、λ基因及重链Fd基因,并成功构建了库容为2×104的轻链基因抗体库和库容为4×104的人Fab抗体库,获得了噬菌体滴度为2×109CFU/ml的富含人源性抗核抗体Fab片段的噬菌体抗体库.结论 成功构建了人源性抗核抗体Fab片段噬菌体抗体库,为人源性抗核抗体Fab片段的制备以及进一步评价其在肿瘤免疫靶向治疗中的作用奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	罗荣城	南方医科大学南方医院肿瘤科	287	1892	18.0	29.0
2	李爱民	南方医科大学南方医院肿瘤科	63	256	9.0	12.0
3	陆慧琦	上海长征医院实验诊断科	6	28	3.0	5.0
4	韩焕兴	上海长征医院实验诊断科	7	30	3.0	5.0
5	钱新宇	南方医科大学南方医院肿瘤科	10	125	4.0	10.0