人源Fab噬菌体抗体库的构建与抗精氨酸加压素抗体的筛选

• 作者: 公倩 朱铁虹 李常颖 畅继武 胡占东 董越华
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 精氨酸加压素 噬菌体抗体库 Fab段 筛选
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 免疫学技术与方法
• 页码范围: 146-149
• 分类号: R392
• 字数: 3423字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2012.02.011

摘要

目的:构建人源天然Fab噬菌体抗体库,筛选抗精氨酸加压素特异性抗体并进行初步鉴定.方法:从18位健康成人的外周血淋巴细胞,提取总RNA.利用RT-PCR扩增人Fab抗体基因片段,将其克隆至噬菌粒载体pComb3XSS内,构建人源天然Fab噬菌体抗体库.以固相化的精氨酸加压素为靶抗原对抗体库进行五轮筛选后,随机挑取50个单克隆进行phage-ELISA检测,阳性克隆行DNA测序分析.结果:成功构建库容为2.4×108的噬菌体抗体库,从中筛选到6株阳性克隆能够与精氨酸加压素特异性结合,其中阳性值最高的C4克隆行DNA测序分析证实其重链属IgG亚类,轻链为λ链.结论:构建大容量人源天然Fab抗体库,从中获得了特异性抗精氨酸加压素人源Fab抗体片段,有望为临床上精氨酸加压素的快速检测技术的建立奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	畅继武	天津医科大学第二医院泌尿外科研究所	59	139	6.0	8.0
2	董越华	天津医科大学总医院内分泌科	2	4	1.0	2.0
3	朱铁虹	天津医科大学总医院内分泌科	39	187	7.0	12.0
4	李常颖	天津医科大学第二医院泌尿外科研究所	19	27	3.0	4.0
5	胡占东	天津医科大学第二医院泌尿外科研究所	2	1	1.0	1.0
6	公倩	山东医学高等专科学校内科学教研室	5	6	2.0	2.0