抗γ-精浆蛋白人-鼠杂合Fab噬菌体抗体库的构建及导向筛选

• 作者: 张思河 张青 杨洁 沈建军 苏明权 郝晓柯
• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 噬菌体抗体库 导向筛选 前列腺癌 人源化
• 年，卷（期）: 2006,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 32-36
• 页数: 5页
• 分类号: R392.11
• 字数: 3334字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2006.01.009

摘要

目的:建立人-鼠杂合Fab噬菌体抗体库,筛选抗γ-精浆蛋白(γ-sm)人源性抗体轻链.方法:PCR扩增前列腺癌患者外周血淋巴细胞人抗体全套轻链基因,克隆入含鼠源抗γ-sm抗体Fd基因的pComb3X噬粒中,建立人-鼠杂合Fab噬菌体抗体库.通过稀释滴定、限制性酶切等分别对库容、基因重组率和多样性进行鉴定.以M13K07辅助噬菌体超感染,利用纯化的γ-sm对杂合库进行筛选,对筛出的阳性克隆进行功能检测.结果:构建了库容量为1.2×107CFU、重组率为90%、多样性好的人-鼠杂合噬菌体抗体库.ELISA检测出2个强阳性克隆,Western blot确证为抗γ-sm的人-鼠杂合Fab,竞争ELISA显示其表观亲和力约为亲本鼠抗体亲和力的71.8%.DNA测序显示筛到的人源轻链可变区基因属IGKV4-1*01胚系家族.结论:成功得到人源性抗γ-sm抗体轻链,为进一步获得全人源化抗体奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郝晓柯	第四军医大学西京医院检验科	322	1751	18.0	23.0
2	张思河	第四军医大学基础部细胞工程研究中心	23	106	6.0	9.0
3	苏明权	第四军医大学西京医院检验科	226	1052	14.0	20.0
4	张青	第四军医大学西京医院检验科	35	119	6.0	8.0
5	沈建军	第四军医大学西京医院检验科	40	228	7.0	13.0
6	杨洁	唐都医院肾脏内科	1	1	1.0	1.0