人-鼠杂合Fab噬菌体抗体库的建立

• 作者: 包国强 杨向民 邢金良 陈志南 马庆久
• 来源期刊: 解放军医学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 抗体库 人源性 肝肿瘤
• 年，卷（期）: 2004,（5）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 433-435
• 页数: 3页
• 分类号: Q392.11
• 字数: 3054字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0577-7402.2004.05.020

摘要

目的建立人-鼠杂合Fab噬菌体抗体库,经过扩增和筛选,得到目的抗体.方法自肝癌患者外周血单个核细胞中扩增全套人抗体Fd片段基因,分别克隆入含嵌合轻链的展示载体pComb3和pComb3X中,建立人-鼠杂合Fab噬菌体抗体库.然后利用肝癌抗原HAb18GE进行筛选,并对抗体库的扩增和筛选条件进行优化.结果 pComb3展示抗体库在37℃进行扩增挽救时存在明显的目的片段重组丢失现象.pComb3X展示抗体库在不同的扩增条件下均未发现明显的重组丢失现象.经过4轮筛选后,噬菌体展示抗体ELISA显示,鉴定克隆与原核表达GST及无关蛋白存在明显交叉反应,而改用诱导表达细菌裂解上清进行ELISA鉴定可以抑制交叉反应的发生.结论通过建立杂合Fab抗体库,并对扩增和筛选条件进行优化,作者获得了目的抗体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈志南	第四军医大学细胞工程中心	114	603	12.0	18.0
2	邢金良	第四军医大学细胞工程中心	35	135	8.0	9.0
3	杨向民	第四军医大学细胞工程中心	25	102	6.0	8.0