人源天然Fab噬菌体抗体库的构建及抗c-Met抗体的筛选、鉴定

• 作者: 万佳艺 冯振卿 刘政 孙慧 朱晓娟 朱进 焦永军
• 来源期刊: 南京医科大学学报（自然科学版）
• 学科: 医学
• 关键词: c-Met 噬菌体抗体库 Fab片段 肿瘤
• 年，卷（期）: 2008,（6）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 697-701
• 页数: 5页
• 分类号: R392.11
• 字数: 3393字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-4368.2008.06.002

摘要

目的:构建大容量人源天然Fab噬菌体抗体库,筛选抗c-Met特异性抗体并进行初步鉴定.方法:采集20位健康成人的骨髓淋巴细胞.用PCR扩增人Fab片断抗体基因,插入载体pComb3XSS内,构建人源天然Fab抗体库.以固相化的抗原对抗体库进行6轮筛选后,随机挑选60个克隆用Phage ELISA、BstO I酶切片断分析进行检测,阳性克隆作可溶性表达和鉴定.结果:构建的Fab噬菌体抗体库的库容为1.2×109,从中筛选到1株与c-Met特异性结合的人源抗体克隆,命名为AM2-26.DNA序列分析证明为人免疫球蛋白可变区基因,Western blot证实为人源抗c-Met Fab抗体片段,ELISA特异性鉴定阳性.结论:构建了大容量人源天然Fab抗体库,从中获得1株抗c-Met人源Fab抗体片段,有望为抗肿瘤药物的研制提供新的候选分子.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘政	南京医科大学第二附属医院消化中心	39	284	10.0	16.0
2	朱晓娟	南京医科大学第二附属医院消化中心	19	38	5.0	6.0
3	焦永军	江苏省疾病预防控制中心卫生部肠道病原微生物重点实验室	35	185	6.0	12.0
4	朱进		2	7	2.0	2.0