人源化Fab段噬菌体抗体库的构建及初步鉴定

• 作者: 公倩 朱铁虹 李常颖 畅继武
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 噬菌体抗体库 抗体Fab段 人源化抗体
• 年，卷（期）: 2010,（7）
• 页码范围: 646-650
• 分类号: R446.62
• 字数: 4390字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2010.07.016

摘要

目的:构建人天然Fab段噬菌体抗体库,为人源抗体的制备建立技术平台.方法:从正常健康人的外周血淋巴细胞中提取总RNA,用RT-PCR方法扩增人抗体轻链和重链Fd段基因,构建噬菌体抗体库,酶切鉴定有无插入片段并测序分析,用IL-2和地高辛进行富集筛选.结果:最终构建的抗体库库容约为8.4×107,酶切鉴定显示有插入片段,抗体库重组率是70%,DNA测序分析证实抗体重链属IgG亚类,轻链为λ链.用IL-2和地高辛进行三轮筛选,抗体库均得到了不同程度的富集.结论:成功构建了一个天然的人源化噬菌体抗体库,可用于下一步胰淀素人源化抗体的筛选、纯化和表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	畅继武	天津医科大学第二医院泌尿外科研究所	59	139	6.0	8.0
2	朱铁虹	天津医科大学总医院内分泌科	39	187	7.0	12.0
3	李常颖	天津医科大学总医院内分泌科	19	27	3.0	4.0
4	公倩	天津医科大学总医院内分泌科	3	5	1.0	2.0