抗人IL-2Rα基因工程抗体Fab的构建和表达

• 作者: 朱迅 李佳莉
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: IL-2Rα 基因工程抗体 Fab
• 年，卷（期）: 2002,（5）
• 所属期刊栏目: 分子与细胞免疫学
• 页码范围: 305-308
• 页数: 4页
• 分类号: R392.11
• 字数: 2958字
• 语种: 中文

摘要

目的:构建和表达抗人IL-2Rα基因工程抗体Fab片段,并测定该抗体片段的生物学活性.方法:采用连续PCR方法构建抗人IL-2Rα抗体Fab克隆载体5G1-pA22,并通过限制性酶切反应将抗人IL-2Rα抗体Fab基因从克隆载体5G1-pA22重组入表达载体pET-28b,并在大肠杆菌BL21(DE3)中用IPTG诱导以包含体形式高效表达,该表达产物约占菌体蛋白20%以上.经超声破碎、洗涤、变性和复性后,采用双抗体夹心ELISA法及体外抗体竞争抑制试验鉴定表达产物的生物学活性.结果:抗人IL-2Rα基因工程抗体Fab成功构建,并以包含体形式表达,表达产物的产量达1 mg/ml.双抗体夹心ELISA法试验表明抗体Fab段与IL-2Rα有特异的结合能力,体外抗体竞争抑制实验表明Fab段可拮抗IL-2与活化T细胞表面IL-2Rα有特异的结合,抑制T细胞活化,增殖,抑制率达90%以上.结论:成功地构建了抗人IL-2Rα抗体Fab段,并获得高效表达,其具有较好的生物学活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱迅	吉林大学基础医学院免疫教研室	49	402	11.0	18.0
2	李佳莉	吉林大学基础医学院免疫教研室	2	14	1.0	2.0