抗人小细胞肺癌单抗2F7人-鼠嵌合Fab片段基因的构建和表达

• 作者: 朱明洁 林琳 胡晶莹 赵新泰 鲁驰
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 抗人小细胞肺癌单抗 人-鼠嵌合抗体 Fab片段 基因工程
• 年，卷（期）: 2003,（3）
• 所属期刊栏目: 肿瘤免疫学
• 页码范围: 173-176
• 页数: 4页
• 分类号: R392.11
• 字数: 2894字
• 语种: 中文

摘要

目的:通过基因工程抗体改造获得具有与人小细胞肺癌有特异性反应的人-鼠嵌合抗体2F7 Fab片段.方法:采用RT-PCR技术从抗人小细胞肺癌单克隆抗体2F7杂交瘤中克隆该抗体的重、轻链可变区基因,将2F7单抗的重、轻链可变区基因装入带有人恒定区基因的表达载体pSW1-Fab中,构建得到pSW1-2F7 Fab,转化受体菌E.coil XL1-Blue,IPTG诱导表达,经Western blot和ELISA鉴定表达蛋白的活性.结果:从抗人小细胞肺癌单克隆抗体2F7杂交瘤中克隆获得了抗体重、轻链可变区基因.测序证实2F7单抗的重链(VH)可变区基因全长362 bp,编码120个氨基酸;轻链(VL)可变区基因全长319 bp,编码105个氨基酸.构建的2F7人-鼠嵌合Fab表达载体诱导后获得了目的蛋白的表达,主要分泌在菌液的上清中,表达量较高且稳定,具有与NCI-H128细胞特异性结合的活性.结论:构建和表达了抗人小细胞肺癌单抗2F7人-鼠嵌合Fab片段,表达产物具有与抗原结合的特异性,为进一步研究和应用打下了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡晶莹	上海市肿瘤研究所细胞及分子免疫学研究室	10	37	3.0	5.0
2	朱明洁	上海市肿瘤研究所细胞及分子免疫学研究室	9	23	3.0	4.0
3	赵新泰	上海市肿瘤研究所细胞及分子免疫学研究室	21	47	4.0	6.0
4	林琳	上海市肿瘤研究所细胞及分子免疫学研究室	4	9	1.0	3.0
5	鲁驰	上海市肿瘤研究所细胞及分子免疫学研究室	1	0	0.0	0.0