人源抗-HAV全分子抗体在CHO细胞中的表达

• 作者: 于长明 刘国奇 徐志凯 徐静 王海涛 童贻刚 陈薇
• 来源期刊: 军事医学科学院院刊
• 学科: 生物学
• 关键词: 基因工程抗体 肝炎病毒,甲型 哺乳动物细胞 真核表达
• 年，卷（期）: 2002,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 176-178，181
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 字数: 2835字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-9960.2002.03.005

摘要

目的:构建人源抗-HAV全分子抗体的CHO细胞表达体系.方法:将抗-HAV抗体轻链全分子(信号肽与VL-CL)基因克隆至表达载体pCI-neo中;将重链信号肽、重链(γ)VH-CH1和Fc基因进行重组形成重链全分子基因,再将其克隆到真核表达载体pCdhfr1中.将轻、重链全分子表达载体共转染CHO/dhfr-细胞,用G-418和甲氨蝶呤(MTX)筛选细胞克隆,ELISA法检测细胞培养上清中的抗-HAV活性,增加MTX浓度进行加压筛选.用蛋白L亲和层析柱从培养上清中纯化重组抗体.结果:构建的真核表达载体可实现抗-HAV全分子抗体在CHO细胞中的分泌表达,纯化的重组抗体在还原SDS-PAGE中表现为相对分子质量约25000、50000两条带;Western印迹表明,重组抗体全分子和重链分子均可和羊抗人Fc抗体发生特异性免疫反应.结论:抗-HAV全分子抗体在CHO细胞中表达,为基因工程生产具有完整功能的全分子抗体奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐志凯	第四军医大学微生物教研室	216	1097	15.0	22.0
2	王海涛	军事医学科学院微生物流行病研究所	99	537	11.0	18.0
3	徐静	军事医学科学院微生物流行病研究所	33	422	10.0	20.0
4	童贻刚	军事医学科学院微生物流行病研究所	58	363	11.0	17.0
5	于长明	军事医学科学院微生物流行病研究所	29	191	7.0	13.0
6	刘国奇	军事医学科学院微生物流行病研究所	7	30	3.0	5.0
7	陈薇	军事医学科学院微生物流行病研究所	61	434	12.0	17.0