CD154 cDNA克隆、单克隆抗体制备及特异性鉴定

• 作者: 何洛文 吴健 孙素莲 寿成超 马泓
• 来源期刊: 上海免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: CD154 克隆 表达 抗体 制备
• 年，卷（期）: 2001,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 173-176
• 页数: 4页
• 分类号: R392.12
• 字数: 3595字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-2478.2001.03.014

摘要

本研究目的是获得特异性抗人CD154单克隆抗体.利用特异引物,通过RT-PCR从人外周血淋巴细胞中扩增出编码CD154分子的cDNA全长,将其克隆在谷胱甘肽巯基转移酶(GST)融合蛋白表达载体pGEX4T-3中,转染大肠杆菌Jm109经诱导获得GST-CD154表达.融合蛋白经分离纯化后,免疫Balb/c小鼠,应用杂交瘤技术,通过ELISA双筛,得到2株抗CD154单抗(1D3和5H4).其亚型分别是IgG2a和IgG1.又将CD154 cDNA全长构建真核表达载体pcDNA3-CD154,并转染COS细胞,以G418筛选后,经RT-PCR结果证实pcDNA3-CD154已成功转染COS细胞.所获单抗对转染CD154的COS细胞和刺激活化的人淋巴细胞有特异性结合反应,为进一步研究单抗功能奠定了实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	寿成超	北京市肿瘤防治研究所暨北京大学临床肿瘤学院	7	58	5.0	7.0
2	吴健	北京市肿瘤防治研究所暨北京大学临床肿瘤学院	2	23	2.0	2.0
3	何洛文	北京市肿瘤防治研究所暨北京大学临床肿瘤学院	2	8	2.0	2.0
4	马泓	北京市肿瘤防治研究所暨北京大学临床肿瘤学院	2	8	2.0	2.0
5	孙素莲	北京市肿瘤防治研究所暨北京大学临床肿瘤学院	5	17	3.0	4.0