核酶在细胞外切割HCV核心区RNA的研究

• 作者: 丁芹 游学科 郑宣鹤 龚国忠
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 核酶 肝炎病毒,丙型 基因治疗
• 年，卷（期）: 2001,（3）
• 所属期刊栏目: 病毒学
• 页码范围: 318-320
• 页数: 3页
• 分类号: R37
• 字数: 3024字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0254-5101.2001.03.031

摘要

目的研究核酶在细胞外切割HCV的作用。方法设计核酶cDNA序列。构建核酶重组质粒及HCV核心区基因cDNA重组质粒。分别进行体外转录，并加入γ-32P ATP以标记HCV RNA。将核酶RNA、HCV核心区RNA、RNA酶抑制剂及反应缓冲液混合温育，以核酶RNA切割HCV RNA。通过变性聚丙烯酰胺凝胶电泳及放射自显影来分析结果。结果β-半乳糖苷酶表型筛选均可见蓝色及白色菌落生长；核酶重组质粒直接测序结果见预期核苷酸序列；HCV重组质粒限制性酶切分析见410bp条带。核酶切割反应显示：反应时间为15和30*!min时可见453、307、146nt 3条带；反应时间为60min时仅见307及146nt 2条带。结论核酶重组质粒构建成功，所设计核酶对HCV有切割作用。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	游学科	湖南医科大学附属第二医院医学实验中心分子生物室	4	4	1.0	1.0
2	龚国忠	湖南医科大学附属第二医院肝病研究中心	6	12	3.0	3.0
3	郑宣鹤	湖南医科大学附属第二医院肝病研究中心	8	16	3.0	3.0
4	丁芹	湖南医科大学附属第二医院肝病研究中心	2	4	1.0	2.0