Bridge Sequence对M1GS核酶体外切割活性的影响

• 作者: 周天鸿 张文军 张欣 李月琴 李泓剑 贾雪芳
• 来源期刊: 广东药学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 桥序列 M1GS 体外切割 核酶P
• 年，卷（期）: 2006,（5）
• 所属期刊栏目: 基础与预防医学
• 页码范围: 537-540,552
• 页数: 5页
• 分类号: R944.5
• 字数: 2472字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-8783.2006.05.024

摘要

目的 探讨Bridge Sequence(桥序列)对M1GS核酶体外切割活性的影响,从而为人工M1GS核酶的优化设计提供一定的理论依据.方法 以含大肠杆菌核酶P催化单位(M1 RNA)基因的pFL117质粒作为模板,通过巧妙设计不同的下游引物,经PCR扩增、扩增产物克隆及克隆基因的体外转录,构建一组具有不同桥序列的人工M1GS核酶.进一步将所构建的上述人工M1GS核酶分别与同位素标记的底物RNA片段进行体外切割试验,并通过同位素扫描成像系统对各M1GS核酶的切割产物加以分析.结果 成功构建了针对HCMV UL54mRNA T7靶位的、四种不同桥序列长度的M1GS核酶,其桥序列长度分别为0nt、6nt、20nt和88nt,并依次命名为M1GS-T7(0)、M1GS-T7(6)、M1GS-T7(20)和M1GS-T7(88).经体外切割试验证实,M1GS-T7(88)的靶向切割活性最强,M1GS-T7(20)的切割活性相对较弱,而M1GS-T7(0)及M1GS-T7(6)则无明显的切割活性.结论 人工M1GS核酶中桥序列的长度对于其体外切割活性具有重要影响,提示在人工M1GS核酶的优化设计时,桥序列的长度是不可忽视的因素之一.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李月琴	暨南大学生命科学与技术学院	81	309	10.0	13.0
2	张欣	暨南大学生命科学与技术学院	33	93	6.0	8.0
3	周天鸿	暨南大学生命科学与技术学院	130	517	10.0	16.0
4	张文军	暨南大学生命科学与技术学院	5	41	3.0	5.0
5	李泓剑	暨南大学生命科学与技术学院	1	7	1.0	1.0
6	贾雪芳	暨南大学生命科学与技术学院	2	7	1.0	2.0