丙型肝炎病毒核心基因靶向性M1GS核酶的构建及鉴定

• 作者: 刘碧瑜 张文军
• 来源期刊: 广东药学院学报
• 学科: 生物学
• 关键词: M1GS 核酶 靶向 丙型肝炎病毒 核心基因
• 年，卷（期）: 2011,（2）
• 所属期刊栏目: 医学研究
• 页码范围: 183-186
• 分类号: Q783
• 字数: 2856字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-8783.2011.02.020

摘要

目的 构建一种具有丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)靶向性的M1GS核酶,为进一步研究引导序列(guide sequence,GS)引导核酶P在RNA水平阻断HCV核心基因(core gene,C)的表达作前期基础.方法 选择HCV基因组中序列相对保守且在病毒复制过程中起关键作用的核心基因作为靶基因,针对该基因mRNA中的潜在切割位点(第52位),设计相应的引导序列及桥序列(bridge sequence).以PCR扩增M1GS,将其插入pGEM-3Z克隆载体;重组的克隆载体经EcoR Ⅰ和Hind Ⅲ双酶切、测序及体外转录鉴定.结果 M1GS-HCV/C52克隆载体经双酶切、琼脂糖凝胶电泳证明插入片段与M1RNA片段大小相符;体外转录产生的M1GS-HCV/C52核酶在体外切割实验中将HCV核心基因RNA切割成2个片段,片段大小符合预期.结论 成功构建出具有体外靶向切割活性的HCV核心基因靶向性M1GS核酶.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张文军	广东药学院基础学院	25	53	5.0	5.0
2	刘碧瑜	广东药学院基础学院	2	3	1.0	1.0