钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ的制备与活性测定

• 作者: 刘景生 孟爱民 杨京 郭庆民
• 来源期刊: 中国医学科学院学报
• 关键词: 钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ 层析 活性测定
• 年，卷（期）: 2001,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 228-231
• 页数: 4页
• 分类号: R96
• 语种: 中文

摘要

目的从牛心肌中提取纯化钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ),并测定其活性.方法采用DEAEcellulose柱层析和Sepharose 4B亲和层析分离纯化蛋白,用γ-32P掺入法测定CaMKⅡ及自磷酸化的CaMKⅡ活性.结果从牛心肌中提取到钙调蛋白结合的蛋白组分,纯化后得到的CaMKⅡ比较稳定,产量也较高.此过程比较简单,适合大量制备.经SDS-PAGE检测,发现酶提取物均质,酶亚基的目的蛋白带相对分子质量为56 000.在syntide-2为底物的反应中,纯化的CaMKⅡ的特异性酶活性为7.84 pmol@[e-mail]Ⅱ可自磷酸化,经过自磷酸化的酶在Ca2+和钙调蛋白不存在时也保持活性.结论通过凝胶层析与亲和层析可提纯CaMKⅡ.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘景生	中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所药理室	8	39	3.0	6.0
2	孟爱民	中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所药理室	38	149	7.0	11.0
3	杨京	中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所药理室	4	11	2.0	3.0
4	郭庆民	中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所药理室	2	29	1.0	2.0