人芳香族氨基酸脱羧酶基因的克隆及测序

• 作者: 刘军 梁秀龄 邢诒刚 陶恩祥
• 来源期刊: 中山医科大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 芳香族氨基酸脱羧酶/遗传学 基因扩增 序列分析
• 年，卷（期）: 2001,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 436-438,450
• 页数: 4页
• 分类号: Q781
• 字数: 2840字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1672-3554.2001.06.010

摘要

[目的]用RT-PCR法获得人类神经元性芳香族氨基酸脱羧酶(AADC)基因全序列,并建立优化方法.[方法]从人嗜铬细胞瘤中提取组织总RNA,自行设计引物,采用两步RT-PCR法扩增出长约1550bp的基因片断,凝胶回收后与高效克隆PCR产物的新型载体T-载体连接,并转化入大肠杆菌,通过蓝白斑反应筛选出重组体,质粒提取后进行重组体的酶切鉴定及基因测序.[结果]BamHⅠ和HindⅢ酶切证实了目的基因同克隆载体进行了有效的连接,基因测序证实了所克隆的片断为人AADC基因.[结论]本实验通过对引物,Taq酶的选择及反应条件的优化,保证了扩增的有效性和特异性.新型的克隆载体明显提高了克隆效率.基因测序证实了AADC基因扩增的成功.本研究为AADC基因治疗帕金森病等多巴胺能缺乏疾病的研究打下了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	梁秀龄	中山医科大学孙逸仙纪念医院神经科	42	355	11.0	16.0
2	邢诒刚	中山医科大学孙逸仙纪念医院神经科	14	126	7.0	11.0
3	刘军	中山医科大学孙逸仙纪念医院神经科	3	17	2.0	3.0
4	陶恩祥	中山医科大学孙逸仙纪念医院神经科	11	124	6.0	11.0