TNF_α基因在鱼腥藻7120中的表达及其产物的亲和层析纯化

• 作者: 叶欣 彭国宏 施定基 李振甲 欧阳叶新 王春梅 董晓军 蔡以滢 邵宁 钟晖
• 来源期刊: 植物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 肿瘤坏死因子α(TNF_α) 转基因蓝藻(鱼腥藻7120) 亲和层析
• 年，卷（期）: 2001,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 46-50
• 页数: 5页
• 分类号: Q943.2
• 字数: 5049字
• 语种: 英文
• DOI: 10.3321/j.issn:1672-9072.2001.01.009

摘要

用转入TNF_α基因并稳定表达了4年多的丝状体蓝藻——鱼腥藻7120 (Anabaena sp. PCC 7120)，研究比较了在培养液中氮源（NaNO3）和碳源（NaAc）对转基因藻生长和TNF_α基因的不同影响。氮源能稳定外源蛋白的表达,而碳源则影响细胞壁的合成。通过比较几种不同的破碎细胞的方法, 发现超声破碎得到的可溶性总蛋白含量和TNF_α含量均要比冻融法高出1倍左右,经过细胞破碎、硫酸铵分级沉淀、常压离子交换液相层析后，除去杂蛋白及大量容易堵柱的糖类等物质，最后通过亲和柱层析，分离出了纯的目标蛋白——重组肿瘤坏死因子（TNF_α）。经凝胶电泳鉴定为单一的谱带，分子量为17 kD。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	彭国宏	中国科学院海洋研究所	10	136	7.0	10.0
2	王春梅	中国科学院植物研究所	49	787	14.0	27.0
3	施定基	中国科学院植物研究所	66	1027	18.0	28.0
4	叶欣	中国科学院植物研究所	9	181	5.0	9.0
6	欧阳叶新	中国科学院植物研究所	5	75	3.0	5.0
7	邵宁	中国科学院植物研究所	4	34	2.0	4.0
10	钟晖		2	23	2.0	2.0
11	蔡以滢	中国科学院植物研究所	1	15	1.0	1.0
12	董晓军		1	15	1.0	1.0
13	李振甲		2	23	2.0	2.0