hGM-CSF基因穿梭表达载体的构建及其在鱼腥藻7120中的克隆

• 来源期刊: 植物研究
• 学科: 生物学
• 关键词: hGM-CSF基因 三亲接合转移 转基因蓝藻 鱼腥藻7120
• 年，卷（期）: 2005,（4）
• 页码范围: 436-440
• 页数: 5页
• 分类号: Q94
• 字数: 2417字
• 语种: 中文

摘要

人粒-巨噬细胞集落刺激因子(hGM-CSF)作为一种造血生长因子,能够刺激T细胞和巨噬细胞增殖、成熟和分化,具有极其重要的免疫调解功能.本研究运用PCR方法,从质粒pAG-MT-8中克隆该基因,并在其5′端添加有利于在蓝藻细胞中高效表达的SD序列,然后插入到表达载体(pRL-439)强启动子PpsbA的下游,进一步与穿梭表达载体pDC-08相连构建成穿梭表达载体pDC-GM.利用三亲接合转移方法将该穿梭表达载体(pDC-GM)转入丝状鱼腥藻7120,通过相应抗生素筛选后得到能稳定遗传的转基因藻.以该转基因藻的基因组DNA为模板进行PCR检测,结果表明hGM-CSF基因已转入鱼腥藻7120.这是首次尝试把蓝藻作为制备重组hGM-CSF的新宿主,具有潜在的经济价值和社会效益.