人GM-CSF基因真核表达载体构建与表达

• 作者: 卢燕茹 江振友
• 来源期刊: 中山大学学报（医学科学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 真核表达载体 hGM-CSF 基因佐剂 双顺反子
• 年，卷（期）: 2007,（5）
• 所属期刊栏目: 技术研究
• 页码范围: 590-593,597
• 页数: 5页
• 分类号: R392.9
• 字数: 3354字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1672-3554.2007.05.026

摘要

[目的]构建以基因佐剂hGM-CSF基因为基础的真核表达质粒pIGM-CSF,并在宫颈癌细胞HeLa中表达与鉴定.[方法]采用聚合酶链反应从载体pORF-hGM-CSF中,扩增出hGM-CSF基因,克隆到双顺反子真核表达载体pIRES的多克隆位点B(MCSB)中,构建pIGM-CSF真核表达载体.然后采用脂质体转染法将其转染HeLa细胞,用RT-PCR在RNA水平和ELISA在蛋白水平检测其在真核细胞中的表达.[结果]所克隆hGM-CSF基因片段经测序完全正确;重组质粒转染Hela细胞后,检测有hGM-CSF表达.[结论]成功构建含基因佐剂真核表达载体pIGM-CSF,并在宫颈癌细胞中能有效表达,为继续克隆目的抗原从而构建双顺反子真核表达质粒奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	江振友	暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室	116	1081	15.0	27.0
2	卢燕茹	暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室	4	35	4.0	4.0