小鼠GM-CSF基因真核表达载体的构建及其表达活性的鉴定

• 作者: 周春霞 张书岭 张友会 张叔人 王东梅 马文波 高全立
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: GM-CSF 基因表达 免疫治疗
• 年，卷（期）: 2002,（7）
• 所属期刊栏目: 分子与细胞免疫学
• 页码范围: 457-460
• 页数: 4页
• 分类号: R392.2
• 字数: 4118字
• 语种: 中文

摘要

目的:构建小鼠GM-CSF基因的高效真核表达载体,筛选导入该载体后高水平表达GM-CSF的小鼠淋巴瘤细胞系RMA,并探讨转GM-CSF基因瘤苗治疗小鼠T淋巴细胞瘤的方法.方法:PCR扩增小鼠GM-CSF cDNA 3'端770 bp的片段,将其插入真核表达载体pcDNA3;用电穿孔法将构建的载体导入小鼠淋巴瘤细胞系RMA,有限稀释法制备单个细胞克隆,经RT-PCR、骨髓祖细胞增殖实验和集落形成实验筛选相对高表达GM-CSF的RMA克隆,该克隆细胞经丝裂霉素灭活后免疫小鼠以诱导其产生抵抗RMA肿瘤细胞再攻击的能力.结果:构建的重组质粒含有预期片段,插入方向正确,核酸序列无误;且获得了高表达GM-CSF的RMA克隆,将其用丝裂霉素灭活免疫小鼠后使它们产生了抗肿瘤免疫保护力.结论:转GM-CSF基因瘤苗可能作为有效的抗T淋巴细胞瘤瘤苗.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张友会		8	45	4.0	6.0
2	张叔人	中国医学科学院中国协和医科大学肿瘤研究所免疫室	25	100	6.0	9.0
3	高全立	河南省血液病治疗中心河南省肿瘤医院血液科	3	9	1.0	3.0
4	周春霞	中国医学科学院中国协和医科大学肿瘤研究所免疫室	2	8	1.0	2.0
5	马文波	中国医学科学院中国协和医科大学肿瘤研究所免疫室	2	8	1.0	2.0
6	张书岭	河南省血液病治疗中心河南省肿瘤医院血液科	1	8	1.0	1.0
7	王东梅	中国医学科学院中国协和医科大学肿瘤研究所免疫室	2	9	1.0	2.0